Forum Aux Questions

COMPTES CLIENTS
Q:

Je suis un nouveau client. Comment puis-je créer un compte ?
A:
Pour créer un nouveau compte, cliquez sur le lien Enregistrement situé dans le coin supérieur droit de notre page d'accueil (www.genewiz.com). Vous pouvez alors saisir un nom de connexion (votre adresse e-mail) et un mot de passe. Ce processus ne prend que quelques minutes ; vous recevez ensuite un e-mail d'activation de compte. Il vous suffit de cliquer sur le lien contenu dans cet e-mail pour activer votre compte. Vous pouvez désormais vous connecter à votre compte à l'aide de votre adresse e-mail et du mot de passe créé. Vous êtes maintenant prêt à passer votre première commande.
Q:

Comment puis-je essayer votre service ?
A:
Nous vous encourageons à essayer les services GENEWIZ. En tant que nouveau client, nous proposons un coupon d'essai gratuit pour essayer nos services de séquençage de Sanger. Tout ce que vous avez à faire est d'imprimer le coupon, de saisir le code dans la section Commentaires de votre première commande et d'envoyer le coupon avec vos échantillons. Si vous avez des questions, n'hésitez pas à nous contacter à l'adresse dnaseq@genewiz.com ou à appeler notre numéro gratuit. Un membre de notre équipe d'assistance technique sera heureux de vous guider tout au long du processus de commande.
Q:

Quel est le prix de ma commande ?
A:
Pour le séquençage de l'ADN, l'affichage des prix lors du processus de commande est disponible pour certains comptes. Si vous souhaitez activer cette fonction, contactez votre directeur des ventes GENEWIZ pour savoir si elle est disponible pour votre établissement. Vous pouvez également contacter votre directeur des ventes pour un devis. Enfin, vous pouvez contacter GENEWIZ après avoir passé votre commande pour obtenir son prix.

Si c'est la première fois que vous passez une commande auprès de GENEWIZ, veuillez noter qu'il se peut que le prix catalogue GENEWIZ soit affiché pour votre compte. Le prix spécifique à votre établissement sera disponible une fois que votre compte sera correctement associé à votre établissement. Si vous avez des questions sur le prix de votre commande, veuillez nous contacter à l'adresse DNAseq@genewiz.com ou contacter votre directeur des ventes.


Q:

Puis-je créer un compte et envoyer des échantillons si je vis hors des États-Unis ?
A:
Absolument. Nous accueillons des clients du monde entier. Lors de la création d'un nouveau compte en ligne, vous serez invité à saisir votre état. Si vous vivez hors des États-Unis, choisissez Autre dans le menu déroulant. Veuillez fournir la ville et le code postal. Tous les autres champs sont automatiquement remplis. Lorsque vous créez un nouveau compte en ligne, il vous suffit de sélectionner votre pays dans les options disponibles. Si vous avez des questions ou rencontrez des problèmes, veuillez contacter notre équipe d'assistance technique.
Q:

Pourquoi devrais-je choisir GENEWIZ ?
A:
Grâce à son excellence opérationnelle et à sa stratégie orientée client, GENEWIZ est devenue le leader des services de séquençage d'ADN et de biologie moléculaire, notamment de synthèse de gènes, en fournissant le meilleur rapport qualité-prix (délais d'exécution rapides, expertise spécialisée, prix compétitifs et assistance client conviviale). Nous innovons continuellement pour produire les meilleurs résultats le plus aisément possible pour nos clients.

ENVOI D'ÉCHANTILLONS POUR LE SÉQUENÇAGE DE L'ADN

Q:

Quelle est la différence entre Prémélangé, Prédéfini et Personnalisé ?
A:

Choisissez Prémélangé si vous avez ajusté la concentration de votre échantillon conformément à nos recommandations et déjà ajouté vos propres amorces de séquençage, ou si vous demandez l'une des amorces universelles GENEWIZ gratuites. 

Choisissez Prédéfini si vous avez ajusté la concentration de votre échantillon conformément à nos recommandations, mais si vous fournissez votre amorce dans un tube séparé (des frais supplémentaires peuvent s'appliquer). 

Choisissez Personnalisé si vous souhaitez que GENEWIZ ajuste la concentration de votre échantillon et ajoute vos amorces (des frais supplémentaires peuvent s'appliquer).

Choisissez Personnalisé si vous demandez un séquençage à partir de colonies bactériennes, de stocks de glycérol ou de phages, ou si vous envoyez des modèles d'ACP non purifiés.

Q:

Comment dois-je préparer mes échantillons afin d'obtenir de bons résultats de séquençage d'ADN ?
A:
Alors que la majorité des réactions de séquençage est correcte, vous devez éviter plusieurs situations qui peuvent créer des résultats défavorables. Suivez les recommandations suivantes pour optimiser vos résultats de séquençage : 

1.) Suivez scrupuleusement nos recommandations relatives à l'envoi d'échantillons pour le séquençage de l'ADN. Un taux ADN/amorce sous-optimal est souvent la cause de résultats de mauvaise qualité. 

2.) Assurez-vous que votre amorce puisse se lier correctement à votre matrice. Une liaison d'amorce insuffisante peut entraîner des résultats décevants. Les amorces de séquençage doivent avoir une longueur de 18-24 bases et une température de fusion de 56-60 degrés. La teneur en GC doit être d'environ 45-55 %, ce qui est généralement nécessaire afin d'obtenir une température de fusion de 56-60. 

3.) Évitez les contaminants inhibiteurs. Les sels, l'EDTA, l'alcool, les protéines, l'ARN, les détergents, le césium et le phénol sont quelques-uns des contaminants les plus courants qui peuvent entraîner des résultats de mauvaise qualité ou l'échec des réactions. 

4.) Veillez à choisir le bon protocole. Certaines matrices (en épingle à cheveux, riche en GC, etc.) exploitent un protocole spécial pour assurer une bonne réaction de séquençage. Nos proposons des protocoles alternatifs (coût supplémentaire) qui sont extrêmement efficaces pour le séquençage dans des régions difficiles. Ces protocoles peuvent être demandés dans le menu déroulant Demandes spéciales de votre formulaire d'envoi en ligne.

Q:

Quels types de matrices d'ADN peuvent être séquencés ?
A:
Nous effectuons des séquençages à partir de plasmides, de produits d'ACP, de clones bactériens (colonies ou stock de glycérol), de surnageants de lyse et d'ADN BAC.
Q:

Quelles quantités d'ADN et d'amorce dois-je envoyer ?
A:
Veuillez suivre scrupuleusement nos recommandations relatives à l'envoi d'échantillons pour le séquençage de l'ADN.
Q:

Comment puis-je déterminer ma concentration d'ADN ?
A:
Nous vous recommandons de vérifier votre concentration d'ADN et les taux 260/280 et 260/230 associés à l'aide d'un spectrophotomètre tel que NanoDrop. Vous pouvez également estimer votre concentration d'ADN sur gel d'agarose en chargeant une petite quantité d'ADN et en la traitant avec un marqueur de concentration connue.
Q:

Puis-je utiliser une barrette de 8 tubes si j'envoie moins de 8 échantillons ?
A:
Oui, vous pouvez séparer les tubes inutilisés et les garder pour votre prochain envoi, ou envoyer la barrette entière de 8 tubes en apposant des étiquettes uniquement sur les tubes contenant vos échantillons.
Q:

Pouvez-vous séquencer des produits d'ACP très courts (100 bp) ?
A:
Nous vous recommandons fortement de séquencer des produits d'ACP d'au moins 200 bp (l'idéal étant 500 bp ou plus).
Q:

Quelles amorces universelles proposez-vous ?
A:

Nous proposons ces trois amorces universelles gratuites. Si vous n'êtes pas sûr de l'amorce universelle se liant à votre construction, utilisez notre outil de sélection d'amorce universelle. Il vous suffit de copier-coller votre séquence FASTA dans la zone de texte, puis l'outil affichera les amorces se liant à votre matrice. Vous trouverez l'outil de sélection d'amorce universelle sur la page d'accueil de votre compte www.genewiz.com.

Q:

Pouvez-vous m'aider si ma séquence est riche en GC et difficile à amplifier ?
A:
Oui, GENEWIZ dispose de protocoles propriétaires éprouvés dans le séquençage de matrices ayant une teneur en GC élevée, ainsi que de matrices présentant d'autres structures secondaires rédhibitoires telles que les épingles à cheveux. Lorsque vous saisissez les instructions de séquençage, sélectionnez l'un des protocoles propriétaires répertoriés dans la colonne Protocole spécial. Des frais supplémentaires s'appliquent.
Q:

Combien de temps conservez-vous mes échantillons ?
A:
Nous conservons vos échantillons d'ADN pendant une semaine, sauf indication contraire. Si vous avez besoin de votre ADN ou de vos amorces pour les prochaines commandes, veuillez l'indiquer dans la section Commentaires de votre commande. Il vous suffit de saisir « Veuillez conserver mon ADN, mon amorce ou les deux pour les prochaines commandes ». Nous pouvons stocker votre ADN pendant un mois et vos amorces pendant un an.
Q:

Comment puis-je savoir si mon vecteur dispose d'un site de liaison pour une amorce universelle ?
A:
Si vous n'êtes pas sûr de l'amorce universelle se liant à votre construction, utilisez notre outil de sélection d'amorce universelle. Il vous suffit de copier-coller votre séquence FASTA dans la zone de texte, puis l'outil affichera les amorces se liant à votre matrice. Vous trouverez l'outil de sélection d'amorce universelle sur la page d'accueil de votre compte www.genewiz.com.
Q:

Que dois-je fournir pour la purification par ACP de mes échantillons ?
A:
Envoyez vos produits d'ACP non purifiés et votre ou vos amorces dans des tubes séparés bien étiquetés. Fournissez également une image du gel et la quantité chargée sur le gel. Assurez-vous de sélectionner Personnalisé comme type de service et Purification par ACP dans la colonne Demande spéciale lors de votre commande. Nous effectuerons la purification, puis optimiserons la réaction de séquençage en fonction de l'image de votre gel.
Q:

Quel type de plaque à 96 cupules dois-je utiliser pour envoyer mes échantillons en vrac ?
A:
Vous pouvez utiliser des plaques et bouchons d'ACP de n'importe quelle marque. Assurez-vous de charger vos plaques sous forme de colonnes ou à la verticale. Voici quelques suggestions de combinaisons plaque/bouchon pour une étanchéité garantie :  

Plaques d'ACP à 96 cupules Nunc Fisher 12-565-536, 12-566-133 ou 12-566-134 avec bouchons 12-565-810 ou 12-575-123 

Plaques d'ACP à 96 cupules Nunc VWR 73520-694, 83009-280 ou 73520-696 avec bouchons 73521-364 ou 73521-066 

Plaques USA Scientific 1402-9400, 1402-9600, 1402-9700 avec bouchons 1400-0800 ou 1400-3800 

Plaques ABI 4306737 avec bouchons 4323032

Q:

Comment dois-je étiqueter mes barrettes de 8 tubes ?
A:

Étiquetez votre tube sur le CÔTÉ avec l'ID de tube généré à partir de votre formulaire de commande en ligne. L'ID de tube est composé de vos initiales et du numéro de tube. Reportez-vous à la figure ci-dessous (si GENEWIZ envoyait des échantillons, l'ID de tube serait GW01-GW08, tel qu'étiqueté ci-dessous). Si Jane Doe envoyait des échantillons, l'ID de tube serait JD01-JD08.

FAQ Enzymatic PCR Purification

RÉSULTATS DE SÉQUENÇAGE D'ADN
Q:

Quand recevrai-je mes résultats de séquençage d'ADN ?
A:
Si vous avez demandé le service le jour même, vous recevrez vos résultats le jour même de l'arrivée des échantillons chez GENEWIZ (lorsqu'ils arrivent avant 10:00). Si vous avez demandé le service Standard, vous obtiendrez vos résultats à midi le jour ouvrable suivant la réception des échantillons par GENEWIZ. Veuillez noter que les clients qui utilisent nos laboratoires situés à San Diego, à Boston, en Caroline du Nord, à Los Angeles, à San Francisco, à Seattle et dans le Maryland bénéficient d'un service local plus rapide. Veuillez nous contacter pour les détails et les conditions d'admissibilité. Nous envoyons toujours une notification par e-mail lorsque vos résultats sont disponibles. N'hésitez pas à vous connecter à votre compte à tout moment pour consulter l'état de votre commande.
Q:

Quel logiciel puis-je utiliser pour consulter mes résultats ?
A:
Dans la section Résultats récents de votre compte, vous avez accès à une page où vous pouvez télécharger vos données (les fichiers .seq et .ab1). Le fichier .seq est un fichier texte qui peut être ouvert avec tout programme de visualisation de fichiers texte (Wordpad, Notepad, etc.). Si vous avez du mal à ouvrir ces fichiers, vous pouvez modifier l'extension du fichier de .seq en .txt en dernier recours pour le consulter.

Le fichier .ab1 est votre chromatogramme. Vous avez besoin d'un logiciel de visualisation de chromatogramme pour consulter ces fichiers. Pour connaître les nombreux logiciels gratuits permettant de visualiser les fichiers de suivi ou de chromatogramme, veuillez consulter la page https://www.genewiz.com/Public/Resources/Tools-for-Viewing-Sequencing-Data (ou cliquez sur le lien Outils de visualisation des données de séquençage dans le menu).

Q:

Combien de temps mes résultats sont conservés dans le système en ligne ?
A:
Nous vous recommandons vivement de télécharger l'ensemble de vos résultats et de les sauvegarder sur l'ordinateur de votre laboratoire. Notre politique actuelle est de stocker vos résultats pendant 6 mois (veuillez noter que toute donnée antérieure à 3 mois nécessitera un transfert à partir de notre archive qui peut prendre jusqu'à 24 heures une fois la demande de transfert effectuée sur la page de vos résultats). Cette politique est sujette à modifications à tout moment, mais celles-ci, le cas échéant, seront clairement communiquées.

À PROPOS DES AMORCES

Q:

Comment concevoir des amorces pour le séquençage ?
A:
Nous vous recommandons de concevoir vos amorces de séquençage dans une région se trouvant à 100 bases en aval de votre séquence d'intérêt. Si vous n'avez pas la chance d'avoir ce tampon, votre amorce doit être proche de votre zone d'intérêt de 50-60 bases maximum. Sinon, vous risquez de manquer une partie de votre région d'intérêt. Les amorces doivent avoir une longueur d'environ 18-24 bases et une température de fusion de 56-60 degrés. La teneur en GC doit être d'environ 45-55 %. De nombreux fournisseurs qui proposent des services de synthèse d'oligonucléotides disposent de logiciels avec lesquels vous pouvez vérifier la température de fusion, la teneur en GC et l'homodimérisation de votre séquence d'amorce. Pour la pureté des oligonucléotides, le dessalage est tout ce dont vous avez besoin pour le séquençage.
Q:
Pouvez-vous commander et stocker des amorces pour moi ?
A:
Oui, nous pouvons commander des amorces pour vous. Des frais supplémentaires s'appliquent. Veuillez remplir le formulaire de commande Amorce de séquençage ; saisissez le nom et la séquence de votre amorce. GENEWIZ stocke les amorces commandées par les clients pendant six mois maximum. Les stocks d'amorces envoyés à GENEWZIZ par les clients peuvent également être stockés sur demande.
Q:
Pouvez-vous concevoir des amorces pour moi ?
A:
La conception d'amorces est incluse dans notre service d'arpentage chromosomique. Notre équipe spécialisée en arpentage chromosomique propose une solution complète pour répondre à vos besoins en matière de séquençage de Sanger, tels que la conception d'amorces, le séquençage d'ADN de Sanger, l'analyse et l'alignement de données, et la génération de rapports. Veuillez contacter notre équipe spécialisée en arpentage chromosomique à l'adresse primerwalking@genewiz.com pour discuter de votre prochain projet.

RÉSOLUTION DES PROBLÈMES

Q:

Que dois-je faire si mes résultats de séquençage échouent ?
A:
Si vous rencontrez des difficultés avec votre commande, nous sommes toujours heureux de vous aider à résoudre les problèmes. L'assistance à la résolution des problèmes est gratuite. Veuillez appeler l'assistance technique GENEWIZ ou nous contacter à l'adresse dnaseq@genewiz.com pour obtenir de l'aide.
Q:

Pourquoi ai-je une région poly-A /T entraînant une séquence de mauvaise qualité ?
A:
Lorsque le polymérase rencontre une région homopolymérique telle que poly-A ou poly-T dans la séquence, il induit souvent une séquence de mauvaise qualité ou non spécifique en raison du glissement de l'enzyme. Lorsque cela se produit, nous recommandons généralement le séquençage en sens inverse pour obtenir les données de séquence manquantes.
Q:

J'ai une amorce très longue et j'obtiens de mauvais résultats. Pourquoi ?
A:
Présentant une température de fusion supérieure, une amorce plus longue ne se fixe pas correctement par annelage à votre matrice d'ADN lors de la réaction de séquençage et génère des résultats peu satisfaisants. Nous vous recommandons d'utiliser nos amorces universelles ou de concevoir vos propres amorces d'une longueur de 18-24 bases et d'une température de fusion de 56-60 degrés.
Q:

Des amorces d'ACP ont été utilisées pour le séquençage. Pourquoi n'ont-elles pas fonctionné ? Le problème peut-il venir d'une amorce altérée ?
A:
Alors qu'une amorce altérée peut être la cause, une autre possibilité est que vos amorces d'ACP sont adéquates pour les réactions d'ACP mais pas pour les réactions de séquençage. Les amorces de séquençage doivent avoir une longueur de 18-24 bases et une température de fusion de 56-60 degrés. Les amorces d'ACP plus longues ne génèrent généralement pas de bons résultats pour les réactions de séquençage. De plus, toutes les amorces d'ACP ne fonctionnent pas bien avec les amorces de séquençage. Si votre amorce d'ACP ne génère pas de bons résultats de séquençage, nous vous recommandons de concevoir une amorce emboîtée que vous utiliserez comme amorce de séquençage.

SERVICES DE SÉQUENÇAGE D'ADN RÉGLEMENTAIRES

Q:

Êtes-vous conforme à la réglementation BPL (bonnes pratiques de laboratoire) ?
A:
Le système qualité GENEWIZ est développé conformément aux normes BPL de la FDA décrites dans le CFR (Code of Federal Regulations, Code des règlements fédéraux), Title 21, Part 58 et aux normes BPL de l'EPA décrites dans le CFR, Title 40, Part 160. Nous proposons des services BPL, tels que les projets de biologie moléculaire et de séquençage d'ADN conformes à la réglementation BPL. Pour plus d'informations, veuillez nous contacter au numéro 877-GENEWIZ (436-3949) ou à l'adresse Regulatory@genewiz.com.

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